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    冲洗:  材料自固定液中取出后,需立即冲洗,使其中所有的固定液全部除去,以妨碍染色 有些固定液,如10%福尔马林液、Bouin氏液固定的材料,若时间较短的话可不必冲洗。但时间过长亦需冲洗  3、脱水(37度恒温箱)  所谓脱水就是利用脱水剂将组织内的水分置换出来,以利于有机溶剂的渗入,这一过程称为脱水。  脱水是否彻底,直接关系到组织是否能充分透明   脱水过度(原因是组织在纯酒精内时间过久,发生组织质地发生变化)容易造成组织发脆。造成组织发脆的原因还有加温(温度超过36℃)、脱水剂内加有丙酮、浸蜡用的石蜡

    中二甲苯过多等等。一般我们总认为组织发脆跟高浓度酒精有关,而忽视了与低浓度的酒精关系,其实低浓度的酒精具有强大的穿透力,比纯酒精更容易渗透到组织块内部使之脱水,组织如果在低浓度酒精里充分脱水,在高浓度酒精里只需脱去从低浓度到高浓度之间的水份,因此,仅需短时间就可完成,如果这时不缩短纯酒精的时间,便会引起组织发脆;如果脱水时加温,使用丙酮,还可引起组织收缩,并影响免疫组织化学的标记.



    空腔器官:食管、胃、肠等应先行剖开,黏膜面向上平铺于软木板上,并用大头针将标本边缘钉于木板上,再放入固定液中,黏膜面覆盖脱脂棉或纱布,或黏膜面向下浸与固定液中。

    脑:整体脑组织固定时,闹底向上,先将一长缝合线穿过脑基底动脉环,然后双手捧着脑组织放入已注入固定液的容器中,再将缝合线两头轻轻向上提起,借助于水的浮力使脑组织悬浮于固定液中,然后将缝合线固定于容器壁上。脑组织固定所需时间较长,一般为10-15天,固定1周时应更换一次固定液。

    眼球:眼球表面结构致密,固定液不宜渗入,固定时应先经角膜直径做一个矢状切口,切开角膜,将小纸片卷成一定厚度插入该切口,使固定液由此切口进入眼球内,以利固定。

    非整体器官的小组织直接用足量固定液固定即可。


    下面从原理方面简要介绍几种常用的组织化学染色技术:

    1、显示琥珀酸脱氢酶(SDH)活性的硝基-BT法:

    (Succinate dehydrogenase)

    ⑴酶的定位及生物学意义:

    琥珀酸脱氢酶是线粒体标志酶,其存在于所有有氧呼吸的细胞,和线粒体内膜紧密结合。该酶不需辅酶而自身有黄素蛋白(FP,Flavoprotein)为辅基。在组化反应中常用来反映三羧酸循环的情况。

    ⑵原理:上述的反应{zh1}一步的原理是,硝基-BT(Nitro-blue tetrozolyum,四唑氮蓝)系异环族化合物四唑盐,当它接受氢时,本身被还原为有色沉淀产物(甲)(Formazan)。


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