透明(56-60度恒温箱) 为了使石蜡浸入到组织块内,必须经过一种既能与脱水剂混合,又能与石蜡相溶的媒介物质,这个过程称透明。 目前{zh0}的透明剂是二甲苯,在常温下,如果不是时间过长(超过24小时以上)二甲苯并不会引起组织过份发脆,相反会使某些组织结构比较质韧的组织:比如子宫肌瘤等相当好切),但是当二甲苯温度超过40℃以后,极易引起组织发脆。 5、透蜡(56-60度恒温箱中) (4-5步骤)80%酒精(≤1h)→→95%酒精(≈1h)→→{bfb}酒精(1)(2)(45-100min)→→1/2二甲苯+1/2酒精(30min)→→二甲苯(35min+30min)→→1/2二甲苯+1/2蜡(45min)→→蜡(1)(2)(1-2h) 6、bao埋
显示葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)活性的铅法:
(Glucosel-phosphate phosphohydrolase)
①酶的定位及其生物学意义:
该酶主要位于内质网,是内质网的标志酶。G-6-Pase参与糖谢,能水解葡萄糖-6-磷酸而释放出葡萄糖和磷酸。
⑵原理:G-6-Pase将底物(葡萄糖-6-磷酸钾盐)水解产生磷酸离子,后者被孵育液中的硝酸铅所捕获,最终反应物为颗粒状的硫化铅沉淀,其反应式如下:
酶Pb(NO3)2
葡萄糖-6-磷酸钾+H2O葡萄糖+磷酸
⑶结果:酶活性部位呈棕色硫化铅颗粒沉淀。在光镜下G-6-Pase活性颗粒较均匀地分布于胞质中。
bao埋在进行石蜡bao埋时,先将熔化的石蜡倒入bao埋模具内,再用加热的钝头镊子轻轻夹取已浸过蜡的组织块,将组织块{zd0}面或特别指定的组织面向下埋入融蜡中,平整地放置于bao埋模具底面中的中央处,用镊子轻轻压平,同时将与组织块有关的编号紧贴于该组织块的旁边。待bao埋模具内的熔蜡表面凝固后,即将模具放入冷水中,以加速熔蜡凝固。石蜡充分凝固变硬后,从bao埋模具内取出凝固的蜡条,按组织块大小切开,把组织块边缘部多余石蜡切掉(组织块周围保留1-2mm蜡边为宜),将bao埋蜡块修整成为规则的正方形或长方形。