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延伸内容
详情介绍: iTRAQ和tmt的技术原理xx一样,不同的是二者的分子结构有差异。与SILAC相比(标记蛋白质),iTRAQ和TMT是对肽段进行标记的。依据iTRAQ/TMT标签的质量数差异,通过MS实现对多组样品中的蛋白质进行相对定量:SILAC是通过一级MS( MSl)对蛋白质进行定量,而iTRAQ/TMT是通过二级MS( MS/MS.MS2)进行定量的iTRAQ/TMT几乎能兼容有来源的蛋白质样品,并且能同时分析多达8-10组的样品,分析通量高。iTRAQ定量蛋白质组学1、分别提取蛋白质并定量;2、Trypsin分别对蛋白进行酶解,提取肽段;3、用不同质量数的iTRAQ/TMT标签分别对肽段样品进行标记:4、标记完成后,混合样品,用SCX进行组分分离(15-20组分);5、对每个组分进行LC-MS分析:6、蛋白质鉴定与定量分析,筛选差异表达的蛋白;7、生物学实验验证(Western blot,EUSA等):iTRAQ定量蛋白质组学技术优势1、高通量,能同时进行多达8-10组样品蛋白质组的定性与定量分析;2、几乎兼容有来源的样品(动植物组织、xx、血液等);3、实验周期。
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